PCR實驗室布局及通風系統設計探討
2021-03-24
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PCR實驗室也叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈反應的簡稱。它是一種分子生物學技術，用于擴增特定的DNA，可視為特殊的DNA體外復制。用于基因檢測，具有靈敏度高、特異性強、快速、簡便等特點。它可以將傳統方法難以檢測到的較少數病毒DNA擴增一百萬倍以上，從而大大提高疾病的診斷水平。它不僅可以用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究，還可以用于疾病診斷或任何有DNA和RNA的地方，也稱為無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術。
1.聚合酶鏈反應實驗室的布局。
聚合酶鏈反應擴增實驗室原則上分為三個獨立的工作區:試劑儲存與制備區、標本制備區、擴增與擴增產物分析區。為了避免交叉污染，進入每個工作區嚴格遵循一個單一的方向，即只能從試劑儲存和制備區到標本制備區，再到擴增和擴增產物分析區。試劑和樣品在實驗區之間的轉移應通過轉移窗口進行。
2.PCR實驗室實驗室空調通風系統的設計及壓力控制。
聚合酶鏈反應實驗室對凈化水平沒有嚴格要求，但為了避免實驗區之間交叉污染的可能性，建議采用全輸送、全排放的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送風和排風的比例，以保證各個實驗區的壓力要求。
(1)試劑儲存和制備區。
PCR實驗室的主要操作是貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合物的制備。用于樣品制備的試劑和材料應直接運輸到該區域，不得通過其他區域。試劑原料存放在該區域，所需存放的試劑在該區域準備。為了控制氣壓，這個區域要對外界保持輕微的正壓。
(2)標本制備區。
PCR實驗室領域的主要操作是樣品保存、核酸(RNA和DNA)的提取和儲存、擴增反應管的添加和DNA合成的測定。要求該區域的壓力梯度相對于鄰近區域為正，以避免氣溶膠污染從鄰近區域進入該區域。此外，采樣操作過程中可能會出現氣溶膠污染，因此應避免在該區域進行不必要的行走。
(3)擴增和擴增產物分析區。
該領域的主要操作是DNA擴增和擴增片段的測定。此外，將制備好的DNA模板加入(從樣品制備區)和將主反應混合物制備到反應混合物中(從試劑儲存和制備區)也可以在該區域進行。PCR實驗室區域的壓力梯度需要相對于鄰近區域的負壓，以避免氣溶膠從該區域泄漏。
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